sábado, 15 de octubre de 2011

PRACTICA ROSA DE BENGALA

ROSA DE BENGALA
(antígeno brucelar amortiguador)



Añadir leyenda















INTRODUCCION:
La brucelosis es una enfermedad causada por La bacteria Brucella esta  puede infectar al ganado vacuno, las cabras, los camellos, los perros y los cerdos. La bacteria se puede diseminar a los humanos si usted entra en contacto con carne infectada o la placenta de animales infectados o si bebe leche o come queso sin pasteurizar.
La prueba del Rosa Bengala o prueba del antígeno tamponado de
Brucella, es una técnica rápida de aglutinación en porta para la
detección de anticuerpos anti-Brucella en sueros animales y
humanos
La determinación se efectúa ensayando la suspensión tamponada
(pH 3,6) de  Brucella coloreada con Rosa Bengala frente a los
sueros problema. La presencia o  ausencia de aglutinación visible
es indicativa de la presencia o ausencia de anticuerpos en las
muestras ensayadas.


NOTA:
Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.




FUNDAMENTO:
Para realizar esta técnica es importante saber que es utilizada para un diagnostico temprano de brucelosis ya que es especifica  por la detección de aglutinas de brucella de forma rápida.

MATERIAL Y REACTIVOS:


v  Antígeno rosa de bengala
vControl positivo de brucella
vControl negativo de brucella
vPlaca
vPipetas  automáticas.




Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.








Obtención de la   muestra:
Obtener 3.0 ml de sangre por punción venosa
Centrifugar y separar el suero.

PROCEDIMIENTO:
v utilizar una pipeta automática que adicione 0.03ml de muestra de suero en el circulo de la placa.
vMezclar el antígeno rosa de bengala hasta que este totalmente homogenizada, después colocar 0.03ml en la placa en el mismo aro donde esta la muestra , s mezcla con un aplicador. Repetir paso para los controles.
vAgitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
vObservar el resultado con la ayuda de una fuente de luz ,leer directamente.











v
NOTA:
Después de leer los resultados y pase cierto tiempo ya no es valida ya que la lectura debe ser inmediata.

RESULTDOS:
PACIENTE: KARINA SIMON MARQUEZ
NEGATIVO-----------------------------------








SI EL RESULTADO HUBIESE SALIDO POSITIVO DEBE SER CONFIRMADA MEDIANTE OTRA PRUEBA CUANTITATIVA PARA BRUCELOSIS COMO: AGLUTINACION LENTA ESTANDAR O AGLUTINACION EN PRESENCIA DE 2-MERCAPTOETANOL.

FALSOS POSITIVOS:
La contaminación bacteriana de controles y muestras, así como
la congelación y descongelación del antígeno, son causas
generales de resultados positivos falsos.
Trazas residuales de detergentes  en las tarjetas visualizadoras
pueden ocasionar asimismo falsas positividades. Lavar las
tarjetas bajo el grifo hasta que se hayan eliminado todos los
residuos y enjuagarlas con agua destilada. Secar al aire,
evitando el empleo de solventes orgánicos puesto que modifican
el acabado especial de las placas.
La suspensión antigénica no debe utilizarse con posterioridad a
su fecha de caducidad, puesto que un almacenamiento más
prolongado puede afectar su sensibilidad.

CONCLUSION:
En el serodiagnóstico de la brucelosis humana, la prueba del Rosa 
Bengala tiene un valor importante en el campo epidemiológico al
permitir agrupar los casos con alto riesgo de infección del resto de
la población estudiada. En el campo veterinario es frecuente su
utilización como prueba diagnóstica en cabañas de vacuno y
porcino en las que la incidencia de brucelosis es relativamente alta,
aplicándose sólo como prueba de control rápido en áreas de baja
incidencia.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los 
anticuerpos anti-Brucella deben ser considerados siempre en
relación a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio. Es por esto el por que de la importancia de esta técnica.








     
VDRL



INTRODUCCION:
La sífilis es causada por la bacteria “treponema pallidium” , por lo general se adquiere por contacto sexual .
La etapa temprana de la sífilis suele causar una llaga única, pequeña e indolora. Algunas veces, causa inflamación de los ganglios linfáticos cercanos. Si no se trata, generalmente causa una erupción cutánea, muchas personas no notan los síntomas durante años, estos pueden desaparecer y aparecer nuevamente. Si se detecta a tiempo, la enfermedad se cura fácilmente con antibióticos.
El diagnostico se realiza en el área de serología por medio de dos clases de anticuerpos : cardiolipina, no treponema e inespecíficos , y los antitreponemas específicos. Por su fácil realización se utiliza la técnica de VDRL; este determinara la floculación en placa de los antígenos.


FUNDAMENTO:
Aprender a realizar la prueba de VDRL para sí mismo poder identificar la presencia de la bacteria de la sífilis por medio de la floculación que sería observada al microscópico y posteriormente proseguir con diluciones que son parte del método cuantitativo si es que fuera positiva.
Floculación: es al precipitado de partículas finas en el caso pruebas serológicas.


Antígeno de suspensión estabilizado (VDRL)
REACTIVOS Y MATERIAL:



qControl positivo     









  • Control negativo
  • Aguja No. 21 sin bisel    
  • Pipetas desechables
  • Placa cóncava  


Añadir leyenda
Método cualitativo:
Procedimiento:
en un anillo de la placa cóncava deposite 0.05ml de suero problema.








En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otro una gota de control negativo. 











Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado a cada uno de los anillos.















Agitar durante 4 minutos ya sea manualmente o con un agitador mecánico.
Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10x.

METODO CUANTITATIVO:
Procedimiento:
Seleccionar el suero positivo obtenidos en la prueba cualitativa
Colocar en una gradilla seis tubos
Agregar a cada uno 0.5ml de solución salina 0.9%
Depositar 0.5 de suero al tubo No. 1 y mezclar
Y así continuar la operación asta el tubo No, 6
Depositar 0.05 de cada una de las diluciones sobre diferentes anillos de la placa












Añadir una gota del Ag en suspensión estabilizado
Agitar 4 minutos ya sea manualmente o por un agitador mecánico.
Leer al microscopio objetivo 10x













Interpretación:
Control positivo:
Presencia de floculación mediante o grande.











Control negativo:
Ausencia de floculación:











FALSOS POSITIVOS:
La capacidad del examen VDRL para detectar sífilis depende de la etapa de la enfermedad. La sensibilidad del examen para detectar la sífilis se acerca al 100% durante las etapas intermedias y es menos sensible durante las etapas más tempranas y tardías.
Las siguientes afecciones pueden provocar un examen falso positivo, como:
VIH
Enfermedad de Lyme
Ciertos tipos de neumonía
Malaria
Lupus eritematoso sistémico .

RESULTADO:
NOMBRE DEL PACIENTE(A): KARINA SIMON MARQUEZ
NEGATIVO-----------------

Conclusión:
El método de floculación es utilizado principalmente para la prueba de VDRL para identificar la presencia de la bacteria de la sífilis. como conclusión es importante realizar la técnica correctamente primero de forma cualitativa solo para saber si ha habido contacto con treponema pallidium agente de la sífilis, posteriormente si es positiva la primera se continuara con el método cualitativo para saber el grado de actividad de esta y que sea el diagnostico correcto y más preciso.


http://acemucsc.galeon.com/articulos/Hematologia/interpretacion_del_hemograma.htm